臨床前研究探討-增殖性糖尿病視網膜病變缺氧誘導紅細胞和視網膜內皮細胞形態學，生物力學和組成變化
- 刊登日期: 2019-03-12
| 執行方法及步驟 | 在生物學和化學方法中：ELISA檢測人血清和幾種糖尿病小鼠模型中NƐ-羧甲基賴氨酸（CML）和炎性細胞因子的水平，而液相色譜-串聯質譜分析（LC / M / SMS） 受試者和動物的全眼組織。 通過免疫螢光測定視網膜細胞上的CML和特異性靶向蛋白Tpl2表達。 在糖尿病大鼠模型中玻璃體內註射藥理抑製劑或中和抗體。 視網膜白內障，光學相干斷層掃描以及H和E染色用於觀察病理特徵。 在物理分析中，我們增加了原子力顯微鏡（AFM）的新方法。 通過CML處理的細胞的紅細胞將被用於測試。 |
| 執行績效 |     |
| 結論與建議 | 我們的實驗成果證實患者血液中CML升高會破壞細胞膜功能，因此是這些患者氧化損傷的潛在生物標誌物。 此外，CML可能在微血管並發症的發生中發揮致病作用。 建議：醫學生物學研究和化學質譜LCMSMS研究長期合作，已穩定與發表連續性文獻。在這項研究計畫中，我們添加了物理原子力顯微鏡（AFM），這是對單分子進行生物物理研究的令人興奮的技術，但其實用性受到儀器漂移的限制。我們通過塗抹RBC進行固定來顯著減少位置漂移，從而使載玻片和表面被動地穩定下來。但是，其中可能顯示了一些問題。由於抹片破壞了物理機械力。先前的報告介紹了六種常見固定溶液的固定能力，包括2.5％戊二醛，10％福爾馬林，4％多聚甲醛，甲醇/丙酮（1：1）和乙醇/乙酸（3：1），聚L-賴氨酸溶液。很可惜的是，在許多已發表的工作中這六種常見固定溶液的固定，在我們原子力顯微鏡評估測試再現的結果並不穩定。此外，除了樣品變化外，技術穩定性應得到提高。何教授實驗室將持續性地解決該問題。正在進行的研究中，我們將專注於細胞生物學領域和動物研究中的細胞表面結構圖像，以與AFM資訊合作。 |
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