執行方法及步驟 |
量測腸道上皮細胞通透性 (intestinal epithelial permeability ) 是評估腸道物理性屏障功能的重要指標,利用於體外半透膜之雙層培養盤中培養人類腸道上皮細胞株,以模擬腸道之管腔與基底層結構,可於活體實驗前,預先評估病原體、益生菌或藥物在腸道中之生理反應,為當今應用性相當多元的實驗方。目前最被廣泛使用的為利用World Precision Instruments (Sarasota, FL, USA) 公司所生產的Epithelial Voltohmmeter (EVOM) 系統 (圖一)。其測定方法是將細胞培養於半透薄膜分隔的雙腔室(chamber)培養盤 (Transwell),但量測時需將細胞盤自培養箱中取出,並且一次僅能量測一培養孔之細胞。本研究欲開發之即時偵測模式將具備以下優勢: (1) 與當今生物實驗常用之Transwell雙腔室培養盤能完美結合; (2) 操作容易,降低污染機率;(3) 在特殊氣體環境或濕度需求的情況下,培養盤可連續放於一般培養箱中,降低環境變因對細胞生長的影響;(4) 量測結果相較於TER原廠量測設置能大幅提升精準度,並消除人為手持誤差;(7) 低開發成本;(8) 設備量測原理與傳統TER量測相同,研究者可以與過去大量的研究文獻相互比對。 |
執行績效 |
本研究之儀器設計,分成二個主要部分:(1) The single-side printing (cis-electrode) flexible printed circuit (FPC) electrodes (2) The cloud-based Arduino Wi-Fi system for data acquisition. 目前第一部分的電極設計,可穩定長時間偵測細胞培養液之電阻值,並將進一步進入偵測腸道上皮細胞電阻值之階段。而第二部分的雲端數據擷取,已可穩定透過Arduino Wi-Fi system於遠端電腦擷取電擊偵測數據,並持續優化中。本研究初步成果已投稿至2021 生物醫學年會,預期在會議中擷取更多專家意見,並進行優化,並推廣本研究成果之未來應用性。 |
結論與建議 |
本研究屬儀器開發,目前準備申請專利中,專利申請完成後,未來亦可技術轉移。且本儀器將實際應用於未來腸胃道研究之論文發表。目前初步的設計為即時擷取6孔細胞培養雙層盤之電阻值,待本技術與條件穩定後,將持續開發可擷取12-24孔細胞培養雙層盤之之細胞電阻值的設備。 |
附件 |
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